Impact de l'infection congénitale par le Cytomégalovirus humain sur la sécrétion de petites vésicules extracellulaires placentaires et conséquences sur le développement cérébral foetal

L'infection congénitale par le Cytomégalovirus humain (hCMV) constitue une problématique majeure de santé publique. Dans les pays dits développés, c'est la première cause d'atteintes neurosensorielles néonatales d'origine infectieuse. L'infection par le hCMV induit des lésions placentaires et cérébrales chez le fœtus, d'intensité très variable. Les mécanismes physiopathologiques conduisant aux lésions fœtales restent toutefois peu compris. Par ailleurs, le suivi médical de cette infection en cours de grossesse est rendu complexe par le manque d'outils diagnostics et pronostics non invasifs. La production de certains médiateurs par le placenta infecté pourrait expliquer en partie la typologie des atteintes retrouvées au niveau fœtal. Parmi ces médiateurs, les petites vésicules extracellulaires (sEV) placentaires transmettent des informations biologiques dans les compartiments maternel et fœtal. Ces nanovésicules lipidiques, chargées entre autres en protéines et miARN, présentent donc un intérêt particulier dans le cadre de l'infection congénitale par le hCMV, car elles pourraient 1/ jouer un rôle dans la transmission d'informations biologiques depuis le placenta infecté vers le fœtus et 2/ permettre, via leur présence dans le compartiment plasmatique maternel, de développer des biomarqueurs permettant de monitorer les grossesses positives pour le hCMV. Au cours de ma thèse j'ai cherché à évaluer ces deux hypothèses, en combinant des modèles cellulaires trophoblastique, d'explants placentaires ex vivo et des prélèvements cliniques in vivo. Dans un premier temps, mes résultats ont montré que l'infection par le hCMV modifie la sécrétion et la composition des sEV trophoblastiques, qui présentent notamment un profil protéique théoriquement facilitateur d'infection. Par la suite, j'ai montré que ces sEV trophoblastiques modifiées par le hCMV exercent un effet proviral sur des cellules fœtales naïves de toute infection (fibroblastes et cellules souches neurales). Cet effet proviral sur le taux d'infection des cellules souches neurales naïves est également retrouvé avec des sEV issues de placenta précoce infecté ex vivo par le hCMV et avec des sEV issues de liquide amniotique de patientes enceintes présentant une séroconversion hCMV. Par ailleurs, j'ai développé une collection biologique visant à prélever différents échantillons chez des patientes présentant une séroconversion hCMV en cours de grossesse. Les deux objectifs de ce biobanking sont de pouvoir valider nos résultats très fondamentaux avec des prélèvements cliniques et, d'autre part, de poser les bases permettant à terme de mettre au point un biomarqueur pronostic de suivi des grossesses positives au hCMV. Dans son ensemble, ce travail propose que les sEV placentaires pourraient participer aux atteintes fœtales observées au cours de l'infection congénitale par le hCMV en facilitant la dissémination virale via une modification de leur composition induite par le virus. Par ailleurs, les sEV placentaires présentes au niveau plasmatique chez la mère pourraient être des candidats de choix dans le développement de nouveaux biomarqueurs pronostiques.Congenital infection by human Cytomegalovirus (hCMV) is a major public health issue. In so-called developed countries, it is the leading cause of neonatal neurosensory defects of infectious origin. Infection by hCMV induces placental and fetal brain lesions of variable intensity. The pathophysiological mechanisms leading to fetal damage, however, remain poorly understood. In addition, the medical monitoring of this pregnancy infection is complicated by the lack of non-invasive diagnostic and prognostic tools. The production of certain mediators by the infected placenta could partly explain the type of fetal damages. Among these mediators, the placental small Extracellular Vesicles (sEV) transmit biological information both in maternal and fetal compartments. These lipid nanovesicles, loaded with proteins and miRNA, are therefore of particular interest in the context of congenital hCMV infection, because they could 1 / play a role in the transmission of biological information from the infected placenta to the fetus and 2 / allow, via their presence in the maternal plasma, the development of biomarkers monitoring hCMV positive pregnancies. During my thesis, I sought to evaluate these two hypotheses, by combining trophoblastic cell models, ex vivo placental explants and in vivo clinical samples. First, my results showed that infection by hCMV modifies the secretion and composition of trophoblastic sEVs, which express a protein profile theoretically facilitating infection. Subsequently, I showed that these trophoblastic sEVs modified by hCMV exert a proviral effect on fetal cells naive of any infection (fibroblasts and neural stem cells). This proviral effect on the rate of infection of naive neural stem cells is also found with sEV from early placenta infected ex vivo and with sEV from amniotic fluid from pregnant patients with hCMV seroconversion. In addition, I developed a biobank composed of different samples from patients experiencing hCMV seroconversion during pregnancy. The two objectives of this biobank are to validate our fundamental results with clinical samples, and on the other hand, to ultimately develop a prognostic biomarker to monitor hCMV positive pregnancies. Taken as a whole, this work suggests that placental sEVs could participate in fetal damage observed during congenital hCMV infection, via a modification of their composition induced by the infection, by facilitating viral dissemination. In addition, the placental sEVs present in the mother's plasma could be prime candidates in the development of new prognostic biomarkers

Human cytomegalovirus infection is associated with increased expression of the lissencephaly gene PAFAH1B1 encoding LIS1 in neural stem cells and congenitally infected brains

peer reviewedCongenital infection of the central nervous system by human cytomegalovirus (HCMV) is a leading cause of permanent sequelae, including mental retardation or neurodevelopmental abnormalities. The most severe complications include smooth brain or polymicrogyria, which are both indicative of abnormal migration of neural cells, although the underlying mechanisms remain to be determined. To gain better insight on the pathogenesis of such sequelae, we assessed the expression levels of a set of neurogenesis-related genes, using HCMV-infected human neural stem cells derived from embryonic stem cells (NSCs). Among the 84 genes tested, we found dramatically increased expression of the gene PAFAH1B1, encoding LIS1 (lissencephaly-1), in HCMV-infected versus uninfected NSCs. Consistent with these ndings, western blotting and immunouorescence analyses conrmed the increased levels of LIS1 in HCMV-infected NSCs at the protein level. We next assessed the migratory abilities of HCMV-infected NSCs and observed that infection strongly impaired the migration of NSCs, without detectable effect on their proliferation. Moreover, we observed increased immunostaining for LIS1 in brains of congenitally infected fetuses, but not in control samples, highlighting the clinical relevance of our ndings. Of note, PAFAH1B1 mutations (resulting in either haploinsufciency or gain of function) are primary causes of hereditary neurodevelopmental diseases. Notably, mutations resulting in PAFAH1B1 haploinsufciency cause classic lissencephaly. Taken together, our ndings suggest that PAFAH1B1 is a critical target of HCMV infection. They also shine a new light on the pathophysiological basis of the neurological outcomes of congenital HCMV infection, by suggesting that defective neural cell migration might contribute to the pathogenesis of the neurodevelopmental sequelae of infectio

Impact de l'infection congénitale par le Cytomégalovirus humain sur la sécrétion de petites vésicules extracellulaires placentaires et conséquences sur le développement cérébral fœtal

Congenital infection by human Cytomegalovirus (hCMV) is a major public health issue. In so-called developed countries, it is the leading cause of neonatal neurosensory defects of infectious origin. Infection by hCMV induces placental and fetal brain lesions of variable intensity. The pathophysiological mechanisms leading to fetal damage, however, remain poorly understood. In addition, the medical monitoring of this pregnancy infection is complicated by the lack of non-invasive diagnostic and prognostic tools. The production of certain mediators by the infected placenta could partly explain the type of fetal damages. Among these mediators, the placental small Extracellular Vesicles (sEV) transmit biological information both in maternal and fetal compartments. These lipid nanovesicles, loaded with proteins and miRNA, are therefore of particular interest in the context of congenital hCMV infection, because they could 1 / play a role in the transmission of biological information from the infected placenta to the fetus and 2 / allow, via their presence in the maternal plasma, the development of biomarkers monitoring hCMV positive pregnancies. During my thesis, I sought to evaluate these two hypotheses, by combining trophoblastic cell models, ex vivo placental explants and in vivo clinical samples. First, my results showed that infection by hCMV modifies the secretion and composition of trophoblastic sEVs, which express a protein profile theoretically facilitating infection. Subsequently, I showed that these trophoblastic sEVs modified by hCMV exert a proviral effect on fetal cells naive of any infection (fibroblasts and neural stem cells). This proviral effect on the rate of infection of naive neural stem cells is also found with sEV from early placenta infected ex vivo and with sEV from amniotic fluid from pregnant patients with hCMV seroconversion. In addition, I developed a biobank composed of different samples from patients experiencing hCMV seroconversion during pregnancy. The two objectives of this biobank are to validate our fundamental results with clinical samples, and on the other hand, to ultimately develop a prognostic biomarker to monitor hCMV positive pregnancies. Taken as a whole, this work suggests that placental sEVs could participate in fetal damage observed during congenital hCMV infection, via a modification of their composition induced by the infection, by facilitating viral dissemination. In addition, the placental sEVs present in the mother's plasma could be prime candidates in the development of new prognostic biomarkers.L'infection congénitale par le Cytomégalovirus humain (hCMV) constitue une problématique majeure de santé publique. Dans les pays dits développés, c'est la première cause d'atteintes neurosensorielles néonatales d'origine infectieuse. L'infection par le hCMV induit des lésions placentaires et cérébrales chez le fœtus, d'intensité très variable. Les mécanismes physiopathologiques conduisant aux lésions fœtales restent toutefois peu compris. Par ailleurs, le suivi médical de cette infection en cours de grossesse est rendu complexe par le manque d'outils diagnostics et pronostics non invasifs. La production de certains médiateurs par le placenta infecté pourrait expliquer en partie la typologie des atteintes retrouvées au niveau fœtal. Parmi ces médiateurs, les petites vésicules extracellulaires (sEV) placentaires transmettent des informations biologiques dans les compartiments maternel et fœtal. Ces nanovésicules lipidiques, chargées entre autres en protéines et miARN, présentent donc un intérêt particulier dans le cadre de l'infection congénitale par le hCMV, car elles pourraient 1/ jouer un rôle dans la transmission d'informations biologiques depuis le placenta infecté vers le fœtus et 2/ permettre, via leur présence dans le compartiment plasmatique maternel, de développer des biomarqueurs permettant de monitorer les grossesses positives pour le hCMV. Au cours de ma thèse j'ai cherché à évaluer ces deux hypothèses, en combinant des modèles cellulaires trophoblastique, d'explants placentaires ex vivo et des prélèvements cliniques in vivo. Dans un premier temps, mes résultats ont montré que l'infection par le hCMV modifie la sécrétion et la composition des sEV trophoblastiques, qui présentent notamment un profil protéique théoriquement facilitateur d'infection. Par la suite, j'ai montré que ces sEV trophoblastiques modifiées par le hCMV exercent un effet proviral sur des cellules fœtales naïves de toute infection (fibroblastes et cellules souches neurales). Cet effet proviral sur le taux d'infection des cellules souches neurales naïves est également retrouvé avec des sEV issues de placenta précoce infecté ex vivo par le hCMV et avec des sEV issues de liquide amniotique de patientes enceintes présentant une séroconversion hCMV. Par ailleurs, j'ai développé une collection biologique visant à prélever différents échantillons chez des patientes présentant une séroconversion hCMV en cours de grossesse. Les deux objectifs de ce biobanking sont de pouvoir valider nos résultats très fondamentaux avec des prélèvements cliniques et, d'autre part, de poser les bases permettant à terme de mettre au point un biomarqueur pronostic de suivi des grossesses positives au hCMV. Dans son ensemble, ce travail propose que les sEV placentaires pourraient participer aux atteintes fœtales observées au cours de l'infection congénitale par le hCMV en facilitant la dissémination virale via une modification de leur composition induite par le virus. Par ailleurs, les sEV placentaires présentes au niveau plasmatique chez la mère pourraient être des candidats de choix dans le développement de nouveaux biomarqueurs pronostiques

Impact of congenital infection by human Cytomegalovirus on placental small extracellular vesicles secretion and consequences on fetal brain development

L'infection congénitale par le Cytomégalovirus humain (hCMV) constitue une problématique majeure de santé publique. Dans les pays dits développés, c'est la première cause d'atteintes neurosensorielles néonatales d'origine infectieuse. L'infection par le hCMV induit des lésions placentaires et cérébrales chez le fœtus, d'intensité très variable. Les mécanismes physiopathologiques conduisant aux lésions fœtales restent toutefois peu compris. Par ailleurs, le suivi médical de cette infection en cours de grossesse est rendu complexe par le manque d'outils diagnostics et pronostics non invasifs. La production de certains médiateurs par le placenta infecté pourrait expliquer en partie la typologie des atteintes retrouvées au niveau fœtal. Parmi ces médiateurs, les petites vésicules extracellulaires (sEV) placentaires transmettent des informations biologiques dans les compartiments maternel et fœtal. Ces nanovésicules lipidiques, chargées entre autres en protéines et miARN, présentent donc un intérêt particulier dans le cadre de l'infection congénitale par le hCMV, car elles pourraient 1/ jouer un rôle dans la transmission d'informations biologiques depuis le placenta infecté vers le fœtus et 2/ permettre, via leur présence dans le compartiment plasmatique maternel, de développer des biomarqueurs permettant de monitorer les grossesses positives pour le hCMV. Au cours de ma thèse j'ai cherché à évaluer ces deux hypothèses, en combinant des modèles cellulaires trophoblastique, d'explants placentaires ex vivo et des prélèvements cliniques in vivo. Dans un premier temps, mes résultats ont montré que l'infection par le hCMV modifie la sécrétion et la composition des sEV trophoblastiques, qui présentent notamment un profil protéique théoriquement facilitateur d'infection. Par la suite, j'ai montré que ces sEV trophoblastiques modifiées par le hCMV exercent un effet proviral sur des cellules fœtales naïves de toute infection (fibroblastes et cellules souches neurales). Cet effet proviral sur le taux d'infection des cellules souches neurales naïves est également retrouvé avec des sEV issues de placenta précoce infecté ex vivo par le hCMV et avec des sEV issues de liquide amniotique de patientes enceintes présentant une séroconversion hCMV. Par ailleurs, j'ai développé une collection biologique visant à prélever différents échantillons chez des patientes présentant une séroconversion hCMV en cours de grossesse. Les deux objectifs de ce biobanking sont de pouvoir valider nos résultats très fondamentaux avec des prélèvements cliniques et, d'autre part, de poser les bases permettant à terme de mettre au point un biomarqueur pronostic de suivi des grossesses positives au hCMV. Dans son ensemble, ce travail propose que les sEV placentaires pourraient participer aux atteintes fœtales observées au cours de l'infection congénitale par le hCMV en facilitant la dissémination virale via une modification de leur composition induite par le virus. Par ailleurs, les sEV placentaires présentes au niveau plasmatique chez la mère pourraient être des candidats de choix dans le développement de nouveaux biomarqueurs pronostiques.Congenital infection by human Cytomegalovirus (hCMV) is a major public health issue. In so-called developed countries, it is the leading cause of neonatal neurosensory defects of infectious origin. Infection by hCMV induces placental and fetal brain lesions of variable intensity. The pathophysiological mechanisms leading to fetal damage, however, remain poorly understood. In addition, the medical monitoring of this pregnancy infection is complicated by the lack of non-invasive diagnostic and prognostic tools. The production of certain mediators by the infected placenta could partly explain the type of fetal damages. Among these mediators, the placental small Extracellular Vesicles (sEV) transmit biological information both in maternal and fetal compartments. These lipid nanovesicles, loaded with proteins and miRNA, are therefore of particular interest in the context of congenital hCMV infection, because they could 1 / play a role in the transmission of biological information from the infected placenta to the fetus and 2 / allow, via their presence in the maternal plasma, the development of biomarkers monitoring hCMV positive pregnancies. During my thesis, I sought to evaluate these two hypotheses, by combining trophoblastic cell models, ex vivo placental explants and in vivo clinical samples. First, my results showed that infection by hCMV modifies the secretion and composition of trophoblastic sEVs, which express a protein profile theoretically facilitating infection. Subsequently, I showed that these trophoblastic sEVs modified by hCMV exert a proviral effect on fetal cells naive of any infection (fibroblasts and neural stem cells). This proviral effect on the rate of infection of naive neural stem cells is also found with sEV from early placenta infected ex vivo and with sEV from amniotic fluid from pregnant patients with hCMV seroconversion. In addition, I developed a biobank composed of different samples from patients experiencing hCMV seroconversion during pregnancy. The two objectives of this biobank are to validate our fundamental results with clinical samples, and on the other hand, to ultimately develop a prognostic biomarker to monitor hCMV positive pregnancies. Taken as a whole, this work suggests that placental sEVs could participate in fetal damage observed during congenital hCMV infection, via a modification of their composition induced by the infection, by facilitating viral dissemination. In addition, the placental sEVs present in the mother's plasma could be prime candidates in the development of new prognostic biomarkers

Impact de l'infection congénitale par le Cytomégalovirus humain sur la sécrétion de petites vésicules extracellulaires placentaires et conséquences sur le développement cérébral fœtal

Congenital infection by human Cytomegalovirus (hCMV) is a major public health issue. In so-called developed countries, it is the leading cause of neonatal neurosensory defects of infectious origin. Infection by hCMV induces placental and fetal brain lesions of variable intensity. The pathophysiological mechanisms leading to fetal damage, however, remain poorly understood. In addition, the medical monitoring of this pregnancy infection is complicated by the lack of non-invasive diagnostic and prognostic tools. The production of certain mediators by the infected placenta could partly explain the type of fetal damages. Among these mediators, the placental small Extracellular Vesicles (sEV) transmit biological information both in maternal and fetal compartments. These lipid nanovesicles, loaded with proteins and miRNA, are therefore of particular interest in the context of congenital hCMV infection, because they could 1 / play a role in the transmission of biological information from the infected placenta to the fetus and 2 / allow, via their presence in the maternal plasma, the development of biomarkers monitoring hCMV positive pregnancies. During my thesis, I sought to evaluate these two hypotheses, by combining trophoblastic cell models, ex vivo placental explants and in vivo clinical samples. First, my results showed that infection by hCMV modifies the secretion and composition of trophoblastic sEVs, which express a protein profile theoretically facilitating infection. Subsequently, I showed that these trophoblastic sEVs modified by hCMV exert a proviral effect on fetal cells naive of any infection (fibroblasts and neural stem cells). This proviral effect on the rate of infection of naive neural stem cells is also found with sEV from early placenta infected ex vivo and with sEV from amniotic fluid from pregnant patients with hCMV seroconversion. In addition, I developed a biobank composed of different samples from patients experiencing hCMV seroconversion during pregnancy. The two objectives of this biobank are to validate our fundamental results with clinical samples, and on the other hand, to ultimately develop a prognostic biomarker to monitor hCMV positive pregnancies. Taken as a whole, this work suggests that placental sEVs could participate in fetal damage observed during congenital hCMV infection, via a modification of their composition induced by the infection, by facilitating viral dissemination. In addition, the placental sEVs present in the mother's plasma could be prime candidates in the development of new prognostic biomarkers.L'infection congénitale par le Cytomégalovirus humain (hCMV) constitue une problématique majeure de santé publique. Dans les pays dits développés, c'est la première cause d'atteintes neurosensorielles néonatales d'origine infectieuse. L'infection par le hCMV induit des lésions placentaires et cérébrales chez le fœtus, d'intensité très variable. Les mécanismes physiopathologiques conduisant aux lésions fœtales restent toutefois peu compris. Par ailleurs, le suivi médical de cette infection en cours de grossesse est rendu complexe par le manque d'outils diagnostics et pronostics non invasifs. La production de certains médiateurs par le placenta infecté pourrait expliquer en partie la typologie des atteintes retrouvées au niveau fœtal. Parmi ces médiateurs, les petites vésicules extracellulaires (sEV) placentaires transmettent des informations biologiques dans les compartiments maternel et fœtal. Ces nanovésicules lipidiques, chargées entre autres en protéines et miARN, présentent donc un intérêt particulier dans le cadre de l'infection congénitale par le hCMV, car elles pourraient 1/ jouer un rôle dans la transmission d'informations biologiques depuis le placenta infecté vers le fœtus et 2/ permettre, via leur présence dans le compartiment plasmatique maternel, de développer des biomarqueurs permettant de monitorer les grossesses positives pour le hCMV. Au cours de ma thèse j'ai cherché à évaluer ces deux hypothèses, en combinant des modèles cellulaires trophoblastique, d'explants placentaires ex vivo et des prélèvements cliniques in vivo. Dans un premier temps, mes résultats ont montré que l'infection par le hCMV modifie la sécrétion et la composition des sEV trophoblastiques, qui présentent notamment un profil protéique théoriquement facilitateur d'infection. Par la suite, j'ai montré que ces sEV trophoblastiques modifiées par le hCMV exercent un effet proviral sur des cellules fœtales naïves de toute infection (fibroblastes et cellules souches neurales). Cet effet proviral sur le taux d'infection des cellules souches neurales naïves est également retrouvé avec des sEV issues de placenta précoce infecté ex vivo par le hCMV et avec des sEV issues de liquide amniotique de patientes enceintes présentant une séroconversion hCMV. Par ailleurs, j'ai développé une collection biologique visant à prélever différents échantillons chez des patientes présentant une séroconversion hCMV en cours de grossesse. Les deux objectifs de ce biobanking sont de pouvoir valider nos résultats très fondamentaux avec des prélèvements cliniques et, d'autre part, de poser les bases permettant à terme de mettre au point un biomarqueur pronostic de suivi des grossesses positives au hCMV. Dans son ensemble, ce travail propose que les sEV placentaires pourraient participer aux atteintes fœtales observées au cours de l'infection congénitale par le hCMV en facilitant la dissémination virale via une modification de leur composition induite par le virus. Par ailleurs, les sEV placentaires présentes au niveau plasmatique chez la mère pourraient être des candidats de choix dans le développement de nouveaux biomarqueurs pronostiques

Usutu Virus Infects Human Placental Explants and Induces Congenital Defects in Mice

International audienceUsutu virus (USUV) is a neurotropic mosquito-borne flavivirus that has dispersed quickly in Europe these past years. This arbovirus mainly follows an enzootic cycle involving mosquitoes and birds, but can also infect other mammals, causing notably sporadic cases in humans. Although it is mainly asymptomatic or responsible for mild clinical symptoms, USUV has been associated with neurological disorders, such as encephalitis and meningoencephalitis, highlighting the potential health threat of this virus. Among the different transmission routes described for other flaviviruses, the capacity for some of them to be transmitted vertically has been demonstrated, notably for Zika virus or West Nile virus, which are closely related to USUV. To evaluate the ability of USUV to replicate in the placenta and gain access to the fetus, we combined the use of several trophoblast model cell lines, ex vivo human placental explant cultures from first and third trimester of pregnancy, and in vivo USUV-infected pregnant mice. Our data demonstrate that human placental cells and tissues are permissive to USUV replication, and suggest that viral transmission can occur in mice during gestation. Hence, our observations suggest that USUV could be efficiently transmitted by the vertical route

Human Cytomegalovirus Infection Changes the Pattern of Surface Markers of Small Extracellular Vesicles Isolated From First Trimester Placental Long-Term Histocultures

International audienceExtracellular vesicles (EVs) have increasingly been recognized as key players in a wide variety of physiological and pathological contexts, including during pregnancy. Notably, EVs appear both as possible biomarkers and as mediators involved in the communication of the placenta with the maternal and fetal sides. A better understanding of the physiological and pathological roles of EVs strongly depends on the development of adequate and reliable study models, specifically at the beginning of pregnancy where many adverse pregnancy outcomes have their origin. In this study, we describe the isolation of small EVs from a histoculture model of first trimester placental explants in normal conditions as well as upon infection by human cytomegalovirus. Using bead-based multiplex cytometry and electron microscopy combined with biochemical approaches, we characterized these small EVs and defined their associated markers and ultrastructure. We observed that infection led to changes in the expression level of several surface markers, without affecting the secretion and integrity of small EVs. Our findings lay the foundation for studying the functional role of EVs during early pregnancy, along with the identification of new predictive biomarkers for the severity and outcome of this congenital infection, which are still sorely lacking

Human Cytomegalovirus Modifies Placental Small Extracellular Vesicle Composition to Enhance Infection of Fetal Neural Cells In Vitro

International audienceAlthough placental small extracellular vesicles (sEVs) are extensively studied in the context of pregnancy, little is known about their role during viral congenital infection, especially at the beginning of pregnancy. In this study, we examined the consequences of human cytomegalovirus (hCMV) infection on sEVs production, composition, and function using an immortalized human cytotrophoblast cell line derived from first trimester placenta. By combining complementary approaches of biochemistry, electron microscopy, and quantitative proteomic analysis, we showed that hCMV infection increases the yield of sEVs produced by cytotrophoblasts and modifies their protein content towards a potential proviral phenotype. We further demonstrate that sEVs secreted by hCMV-infected cytotrophoblasts potentiate infection in naive recipient cells of fetal origin, including human neural stem cells. Importantly, these functional consequences are also observed with sEVs prepared from an ex vivo model of infected histocultures from early placenta. Based on these findings, we propose that placental sEVs could be important actors favoring viral dissemination to the fetal brain during hCMV congenital infection